产品货号:
QN2089
中文名称:
通用型反转录试剂盒
英文名称:
Universal RT-PCR Kit(M-MLV)
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒适用于各种RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。
本试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT酶采用进口的M-MLV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
组分 | 50T | 100T |
M-MLV(200U/μL) | 50μL | 50μL×2 |
5×M-MLV Buffer | 200μL | 400μL |
Oligo(dT)16(10μM) | 100μL | 200μL |
RNasin(40U/μL) | 25μL | 50μL |
dNTPs(10mM) | 50μL | 100μL |
RNase-free ddH2O | 1mL | 1mL×2 |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期1年。
- 用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。
- 试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。
- RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。
- 在冰浴的无RNase的离心管中加入如下反应成分:
成分 用量 模板 总RNA 1~5μg mRNA 50~500ng 引物 Oligo(dT)16 2μL 基因特异性引物 2pmol RNase-free ddH2O 至14.5μL - 70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:
成分 用量 5×M-MLV Buffer 4μL dNTPs 1μL RNasin 0.5μL M-MLV 1μL - 42℃温浴60min,如果是用随机引物,请先将离心管置25℃温浴10min,再42℃温浴60min。
- 95℃加热5min终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。
- 若用于后续PCR扩增,用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50μL,取2~5μL作为PCR反应模板。
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